Kamis, 14 Juni 2012

Resep Media Murashige dan Skoong (MS) dan Vacin dan Went (VW)

ini merupakan resep dari dua macam media sederhana yang biasa digunakan dalam kultur jaringan.

A. Media Murashige dan Skoong (MS)
Bahan:
1. 4,85 mL NH4NO3
2. 50 mL KNO3
3. 50 mL KH2PO4,H3BO3,KI,NaMoO4.2H2O,CoCl2.6H2O
4. 50 mL CaCl2.2H2O
5. 5 mL MgSO4.7H2O,MnSO4.4H2O,ZnSO4.4H2O,CuSO4.5H2O
6. 5 mL Na2EDTA,FeSO4.7H2O
7. 10 mL Vitamin : Myo-inositol, Glisin, Niasin, Pridoksin-HCl, Tiamin Hcl
8. 30 g Prolin Sukrosa
9. 7 g Agar

Cara pembuatan:
1. Mencampurkan antara 4,85 mL NH4NO3, 50 mL KNO3, 50 mL campuran senyawa KH2PO4,H3BO3,KI,NaMoO4.2H2O,CoCl2.6H2O, 50 mL CaCl2.2H2O, 5 mL campuran senyawa MgSO4.7H2O,MnSO4.4H2O,ZnSO4.4H2O,CuSO4.5H2O, 5 mL Na2EDTA, FeSO4.7H2O dan 10 mL vitamin dalam erlemeyer.
2. Mengencerkan larutan tersebut hingga volumenya menjadi 1000 mL, dan ditambahkan 30 g prolin sukrosa dan 7 g agar.
3. Mengaduk larutan dengan magnetic starter dan mendidihkannya pada hot plate kemudian didinginkan.
4. Mengkondisikan agar pHnya 5,6 dan media disterilisasi dalam autoclove






B. Media Vacin dan Went (VW)
Bahan:
1. 1000 mg NH4NO3
2. 1050 mg KNO3
3. 500 mg KH2PO4
4. 500 mg (Ca2)3PO4
5. 5000 mg MgSO4.7H2O, 14 mg MnSO4.4H2O
6. 56 mg Fe3-Tartrat
7. 20 g Sukrosa
8. 7 g Agar
9. 50 mL Air kelapa tiap 200 mL larutan

Cara pembuatan:
1. Memasukkan 1000 mg (NH4)2NO3 kedalam elenmeyer, ditambahkan 1050 mg KNO3, 500 mg KH2PO4, 5000 mg MgSO4.7H2O, 14 mg MnSO4.4H2O, 500 mg (Ca2)3PO4 dan Fe3-Tartrat 56 mg.
2. Mengencerkan hingga volumenya 1000 mL, dan ditambahkan sukrosa 20 g dan agar 7 g.
3. Mengaduk larutan menggunakan magnetic stirrer dan memanaskannya dengan hotplate. Kemudian larutan didinginkan.
4. Membuat media dengan konsentrasi air kelapa 20% dengan cara masukan larutan sebanyak 200 mL dan ditambahkan tambahkan air kelapa 50 mL.
5. Mengkondisikan larutan agar pHnya 5,6 dan media disterilisasi dalam autoclove

0 komentar:

Posting Komentar